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农杆菌菌株GV3101(pMP90RK)说明书

发布日期:2017-01-07

1       简要介绍

本菌种具有利福平、庆大霉素和卡那霉素。引进后视为第一代。用接种环接种至3mL YEB50μg/ml Rif50μg/ml Gent50μg/ml Kana)液体培养基中28度培养至OD600=0.50,视为第二代,按照照11的体积比加入50%甘油,按照每管200ul的量分装至1.5 mLEP管中,-80度保存。再按照10%的接种量接种至100 mL YEB50μg/ml Rif50μg/ml Gent50μg/ml Kana)培养基中37度培养至OD600=0.50,视为第三代。按照11的体积比加入50%甘油,按照每管1mL的量分装至1.5 mLEP管中,-80度保存。

 

2       使用方法

(1)       YEB50μg/ml Rif50μg/ml Gent50μg/ml Kana)培养基配方:牛肉浸膏 5 g/L ,酵母浸膏 1 g/L ,蛋白胨 5 g/L ,蔗糖 5 g/L MgSO4·H2O 0.5 g/L PH 7.0121 25min灭菌后,待培养基温度至40℃以下,加入无菌的利福平、庆大霉素和卡那霉素抗生素至浓度为50μg/ml

(2)       用接种环接种至3mL YEB50μg/ml Rif50μg/ml Gent50μg/ml Kana)培养基液体培养基中28度培养至OD600=0.50,按照照11的体积比加入50%甘油,按照每管200ul的量分装至1.5 mLEP管中,-80度保存。

(3)       按照10%的接种量接种至100 mL YEB50μg/ml Rif50μg/ml Gent50μg/ml Kana)培养基培养基中28度培养至OD600=0.50,按照11的体积比加入50%甘油,按照每管1mL的量分装至1.5 mLEP管中,-80度保存。

(4)       我们推荐保存2代,视为安全保菌方式。

 

注:如果没有利福平、庆大霉素和卡那霉素三种抗生素,可不用加利福平或庆大霉素,但卡那霉素必须的。推荐您购买瑞楚生物进口分装抗生素。

 

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