ECL鲁米诺化学发光试剂盒
产品简介
ECL鲁米诺化学发光试剂盒用于检测辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白检测。在过氧化氢的存在下,辣根过氧化物酶催化发光液中的底物氧化并发光,此光可经X光-胶片感光记录下来。
产品特点
1. 操作方便,使用前将溶液A和溶液B混合即可。
2. 灵敏度高。
3. 稳定性好。
运输和保存条件
本试剂盒4°C运输,溶液A和溶液B都应存储于4°C,有效期为6个月。
操作步骤
1. 进行Western Blotting实验,常规电泳、转膜、孵育一抗,HRP标记二抗,洗膜,以下操作可在室温下进行。
2. 新鲜配制发光工作液,将溶液A和溶液B按1:1比例混合,例如1 ml溶液A与1ml溶液B混合即成工作液。
3. 将漂洗过的膜用吸水纸除去膜上多余的洗涤液,但不要使膜完全干燥,并将其转移至洁净的保鲜膜内,蛋白面朝上,用枪头将配制好的发光工作液均匀的涂抹在膜的表面。
4. 蛋白面朝上固定于X胶片暗盒中或成像仪中。
5. 暗房中进行曝光,可在暗房内放置红灯,先预曝光1 min,根据显影效果控制显影时间,定影1 min。根据预曝光效果确定曝光时间,以便得到较好的曝光图片。 成像仪按照仪器操作步骤,设置连续曝光时间,进行连续拍照。
6. 曝光后将定影的胶片取出,在自来水中轻轻漂洗,晾干后扫描图片,以便保存。 成像仪连续曝光后,取最佳的曝光图片作为最终结果。
注意事项:
1. 试剂盒应避光保存。
2. 发光工作液要现配现用,且在强光下信号容易淬灭,因此配制后应避光保存。
3. 曝光时取适量的工作液,避免多余的发光液浸湿胶片,影响曝光效果。
增强型 ECL鲁米诺化学发光试剂盒
蛋白电泳